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pcr實(shí)驗(yàn)室工作制度及流程篇一

pcr實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。pcr是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction)的簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于放大特定的dna片段，可看作生物體外的特殊dna復(fù)制。通過(guò)dna基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達(dá)納米級(jí)別，精確檢測(cè)乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強(qiáng)、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時(shí)判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗(yàn)依據(jù)

條件

1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的pcr熒光實(shí)驗(yàn)室;實(shí)時(shí)熒光定量pcr技術(shù)于1996年由美國(guó)applied biosystems公司推出 由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了pcr從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)pcr相比，它 有特異性更強(qiáng)、有效解決pcr污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前已得到廣 泛應(yīng)用。本文試就其定量原理、方法及參照問(wèn)題作一介紹

2、檢測(cè)設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)pcr熒光實(shí)驗(yàn)室設(shè)置要求;熒光定量pcr儀+實(shí)時(shí)熒光定量試劑+通用電腦+自動(dòng)分析軟件，構(gòu)成pcr-dna/rna實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)。

3、必須通過(guò)國(guó)家臨床檢驗(yàn)中心的驗(yàn)收和認(rèn)證;

4、檢測(cè)人員必須通過(guò)國(guó)家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓(xùn)并取得合格證書(shū);pcr實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員必須參加由國(guó)家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗(yàn)中心舉辦的臨床基因擴(kuò)增培訓(xùn)班，并持證上崗。pcr實(shí)驗(yàn)室通過(guò)驗(yàn)收，實(shí)驗(yàn)室至少必須應(yīng)有兩個(gè)以上持有“臨床基因檢測(cè)上崗證”。pcr實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序（sop）、建立系列質(zhì)量管理文件等，確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國(guó)家衛(wèi)生部的要求，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全，確保實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行

5、必須在無(wú)菌無(wú)塵環(huán)境下進(jìn)行操作

功能

能夠?qū)颊卟∏檫M(jìn)行科學(xué)、準(zhǔn)確、實(shí)時(shí)的掌控，并結(jié)合抗hbv與t細(xì)胞免疫來(lái)打破免疫耐受，阻斷肝病病毒復(fù)制的療法、有效的分解肝炎病毒，解決了乙肝病毒易變異、耐藥，病毒復(fù)制模板難以治療，人體免疫耐受狀態(tài)不易打破等醫(yī)學(xué)難題，能迅速消除臨床癥狀，而且有效抑制乙肝病毒復(fù)制，明顯加快e抗原、抗體的血清轉(zhuǎn)換速度，殺滅血液及肝細(xì)胞內(nèi)的病毒，為防止再感染提供了長(zhǎng)期保護(hù)，有效阻斷和逆轉(zhuǎn)肝纖維化、肝硬化進(jìn)程。

建立方法

1、建立樣品準(zhǔn)備區(qū)

這個(gè)區(qū)域?qū)ｉT用作樣品的準(zhǔn)備，在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應(yīng)該采取預(yù)防措施：⑴pcr產(chǎn)物和帶有要擴(kuò)增序列的dna克隆不能在這個(gè)房間操作。⑵組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品都帶進(jìn)樣品準(zhǔn)備間處理，以根據(jù)應(yīng)用的需要提取dna或rna。⑶用于樣品處理的工具不能被用作普通分子克隆的工具，也不能用作操作靶序列。⑷dna樣品應(yīng)該用有專門的防護(hù)或正壓活塞式移液管操作，以防止在吸取樣品時(shí)有氣溶膠遺留。⑸大體積樣品應(yīng)該用單獨(dú)包裝的無(wú)菌一次性移液管吸取。⑹管子打開(kāi)前都要簡(jiǎn)短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生，而且管子不能用力崩開(kāi)，這樣會(huì)產(chǎn)生氣溶膠。⑺任何時(shí)候都應(yīng)該穿實(shí)驗(yàn)服和帶手套，手套要經(jīng)常更換，尤其在抽提過(guò)程中每一步之間都要更換。實(shí)驗(yàn)服要專門用于樣品準(zhǔn)備間，經(jīng)常清洗。

2、樣品準(zhǔn)備和rna-pcr rna-pcr的額外步驟需要額外的樣品操作，這樣增加了樣品之間污染的機(jī)會(huì)。為了避免這一問(wèn)題，反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行。在rna-pcr中應(yīng)用ung以防止污染的方法也有報(bào)道。

3、建立前pcr區(qū)。

該去專門用于準(zhǔn)備各種反應(yīng)，這個(gè)區(qū)域必須保持干凈，而且沒(méi)有來(lái)自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前pcr區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備，特別是專門用于前pcr區(qū)的正壓活塞式移液管。

4、pcr實(shí)驗(yàn)室試劑的操作。

⑴所用的所有溶液都應(yīng)該沒(méi)有核酸和（或）核酸酶（dnase和rnase）污染。⑵所有pcr試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的－新鮮蒸餾的去離子水，用0.22μm過(guò)濾的，并且是高壓滅菌。⑶在20℃到25℃貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類的抗微生物劑，在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。⑷所用試劑都應(yīng)該以大體積配制，實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。⑸所有試劑和樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。⑹新配制的試劑在用于準(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。⑺樣品準(zhǔn)備和前pcr區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存。

5、在前pcr區(qū)建立pcr混合物。

⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃，在實(shí)驗(yàn)室只涉及到擴(kuò)增一種或少數(shù)幾種特異序列時(shí)這樣做很有用。⑵如果你的實(shí)驗(yàn)室使用多套引物，以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì)，可以考慮分裝保存夠一天的pcr成分。⑶作為一個(gè)規(guī)則，應(yīng)該保存一套陰性、弱陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照樣品來(lái)分析樣品配制和pcr前過(guò)程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過(guò)使用一個(gè)已知的弱陽(yáng)性樣品來(lái)驗(yàn)證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。⑷陰性樣品要與每組樣品同時(shí)做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在pcr產(chǎn)物的污染，陰性對(duì)照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。⑸當(dāng)做陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，有兩個(gè)理由決定了應(yīng)該使用最少數(shù)量的核酸。⑹由于必須有對(duì)照反應(yīng)，對(duì)照模板的特點(diǎn)應(yīng)該予以考慮。

6、控制污染的方法。

已設(shè)計(jì)出很有力的酶學(xué)方法用來(lái)消除一種形式的污染—使用ung，這一技術(shù)能有效地消除由pcr產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線，這種方法不能完全消除污染問(wèn)題，但可以將污染降低幾個(gè)數(shù)量級(jí)。

7、后pcr區(qū)pcr完成以后，需要分析樣品并解釋數(shù)據(jù)，應(yīng)該留出一個(gè)專門用于反應(yīng)后處理樣品的地方。后pcr活動(dòng)中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門用于這一目的，決不能把實(shí)驗(yàn)室這一區(qū)域的試劑或儀器用于任何前pcr活動(dòng)

pcr實(shí)驗(yàn)室工作制度及流程篇二

pcr實(shí)驗(yàn)室工作制度

1.實(shí)驗(yàn)室內(nèi)必須保持安靜、整潔，不得大聲喧嘩，不得在室內(nèi)從事與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的事宜。2.禁止與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)人員出入，實(shí)驗(yàn)室主要通道入口及功能區(qū)域應(yīng)有特殊的標(biāo)志。3.實(shí)驗(yàn)室各區(qū)域有各自專用的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材，包括工作服、拖鞋、潔凈鞋，一次性消耗品、辦公用品等，各有明顯的標(biāo)志，絕對(duì)不能混用。4.嚴(yán)格遵守人員及物品按單向流動(dòng)，不得交叉混流。

5.嚴(yán)格按照基因檢測(cè)操作規(guī)程進(jìn)行實(shí)驗(yàn)和使用儀器設(shè)備，定期檢測(cè)、校準(zhǔn)并做好記錄工作。6.每次基因檢測(cè)中應(yīng)設(shè)立陰陽(yáng)對(duì)照。

7.實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照pcr實(shí)驗(yàn)室操作程序進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前必須做好室內(nèi)及工作臺(tái)的清潔消毒，離心管、吸頭等一次性用品需高壓滅菌處理。

8.工作結(jié)束后必須立即應(yīng)用10％次氯酸鈉溶液消毒實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面，并用紫外燈照射實(shí)驗(yàn)室。試驗(yàn)中使用過(guò)的吸頭，離心管等應(yīng)送到指定的地點(diǎn)進(jìn)行處理。

9.每日工作開(kāi)始前需開(kāi)啟風(fēng)機(jī)及空調(diào)系統(tǒng)，在運(yùn)行30分鐘后，記錄各壓差表數(shù)，如壓差低于設(shè)定值的20％需及時(shí)清洗過(guò)濾系統(tǒng)，并填寫相關(guān)記錄表。如風(fēng)機(jī)系統(tǒng)出現(xiàn)故障時(shí)，該實(shí)驗(yàn)室應(yīng)停止使用。

北京海樂(lè)思醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所

pcr實(shí)驗(yàn)室工作制度及流程篇三

試劑準(zhǔn)備區(qū)工作制度

一、實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須更換工作服，穿本區(qū)專用綠色工作服，戴帽子、口罩及更換專用拖鞋。

二、實(shí)驗(yàn)員在試劑準(zhǔn)備區(qū)接收標(biāo)本、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)用的試劑。

三、實(shí)驗(yàn)員每天收齊標(biāo)本，驗(yàn)收登記后，將標(biāo)本通過(guò)傳遞窗送入標(biāo)本制備區(qū)。

四、在試劑準(zhǔn)備區(qū)配置好試劑后放入冰箱內(nèi)備用。需要時(shí)通過(guò)傳遞窗送入標(biāo)本制備區(qū)。

五、每天的標(biāo)本及配置的試劑須登記記錄，應(yīng)書(shū)寫工整詳細(xì)，使用本區(qū)專用的、帶有本室標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆。

六、將本區(qū)廢棄物裝入本室垃圾袋中，有專人將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室交醫(yī)院集中處理。

七、實(shí)驗(yàn)后須使用含氯消毒液及75%的乙醇擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，紫外燈消毒30分鐘，記錄紫外燈、冰箱、離心機(jī)等儀器的使用情況。

標(biāo)本制備區(qū)工作制度

一、實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須更換工作服，穿上本區(qū)專用藍(lán)色工作服，戴帽子、口罩及更換專用拖鞋。

二、把已準(zhǔn)備好的試劑放入冰箱試劑存放專區(qū)暫存。

三、記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)、冰箱的溫度。

四、嚴(yán)格按照sop文件及試劑盒要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，加樣好的pcr管須通過(guò)傳遞窗送入擴(kuò)增及產(chǎn)物區(qū)。

五、使用本區(qū)專用的移液器及吸頭，使用過(guò)的離心管、吸頭須置于盛有含氯消毒液的廢液缸中，實(shí)驗(yàn)完畢后及時(shí)處理。將本區(qū)廢棄物裝入本室垃圾袋中，有專人將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室交醫(yī)院集中處理。

六、使用本區(qū)專用的帶有本區(qū)標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆，其他區(qū)的用品不得帶入本區(qū)。

七、實(shí)驗(yàn)完畢關(guān)閉所有儀器，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。

八、實(shí)驗(yàn)后須使用含氯消毒液及75%的乙醇擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，紫外燈消毒30分鐘，記錄紫外燈、冰箱、離心機(jī)等儀器的使用情況。

擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)工作制度

一、實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須更換工作服，穿上本區(qū)專用粉紅色工作服，戴帽子、口罩及更換專用拖鞋。

二、記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)、冰箱的溫度。

三、本區(qū)主要進(jìn)行目的基因的擴(kuò)增及分析，須熟悉各擴(kuò)增儀的使用，擴(kuò)增分析完后，記錄結(jié)果。

四、得到當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果后，及時(shí)記錄在室內(nèi)質(zhì)控圖上并進(jìn)行分析。

五、試驗(yàn)完畢后關(guān)掉擴(kuò)增儀，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。

六、每周由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)進(jìn)行清潔維護(hù)并記錄。

七、擴(kuò)增分析完后的反應(yīng)管，須裝入本室垃圾袋中，有專人將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室交醫(yī)院集中處理。

八、使用本區(qū)專用的帶有本區(qū)標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆，其他區(qū)的用品不得帶入本區(qū)。

九、實(shí)驗(yàn)后須使用含氯消毒液及75%的乙醇擦拭實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，紫外燈消毒30分鐘，記錄紫外燈、冰箱、離心機(jī)等儀器的使用情況。

pcr實(shí)驗(yàn)室工作制度及流程篇四

高端pcr實(shí)驗(yàn)室控制設(shè)計(jì)說(shuō)明

pcr實(shí)驗(yàn)室即分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室，在醫(yī)療、科研、生物技術(shù)方面得到廣泛的應(yīng)用。因其在不同行業(yè)的應(yīng)用各有區(qū)別，在具體設(shè)計(jì)時(shí)也有不同之處，就醫(yī)療機(jī)構(gòu)的應(yīng)用而言，主要使用三區(qū)或四區(qū)設(shè)計(jì)，即試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品提取區(qū)、擴(kuò)增分析區(qū)；此類三區(qū)設(shè)計(jì)時(shí)候應(yīng)用于類似熒光定量型或同類pcr分析設(shè)備，及擴(kuò)增與分析過(guò)程在設(shè)備內(nèi)一次完成。而四區(qū)設(shè)計(jì)在三區(qū)的基礎(chǔ)上講擴(kuò)增分析區(qū)拆分為擴(kuò)增區(qū)與分析區(qū)適用于其他類型的pcr設(shè)備及手工處理。

在pcr實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)上，經(jīng)過(guò)多年的經(jīng)驗(yàn)累積，已經(jīng)在一些關(guān)鍵技術(shù)上達(dá)成了共識(shí)。因?yàn)閜cr實(shí)驗(yàn)中所產(chǎn)生的dna與rna片段過(guò)于微小，以至于可以穿透高效過(guò)濾器，所以在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)上已經(jīng)不在強(qiáng)制要求設(shè)計(jì)高效凈化系統(tǒng)，但是為了提高實(shí)驗(yàn)環(huán)境水平及保護(hù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的敖貴設(shè)備方面，如果在具備條件的情況下可考慮追加高效空氣凈化系統(tǒng)；建議凈化級(jí)別萬(wàn)級(jí)。在pcr實(shí)驗(yàn)中所產(chǎn)生的dna與rna片段污染是一直以來(lái)pcr實(shí)驗(yàn)的重點(diǎn)問(wèn)題。此類污染主要至上次試驗(yàn)中所產(chǎn)生的基因片段對(duì)下次試驗(yàn)產(chǎn)生的污染，而且一旦試驗(yàn)環(huán)境中的污染形成后很難處理。因?yàn)橄镜葌鹘y(tǒng)方式對(duì)于基因污染沒(méi)有很良好的效果。所以在pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)中一般將整套實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)為全新風(fēng)型實(shí)驗(yàn)室，這樣而已通過(guò)有效的換氣次數(shù)來(lái)達(dá)到凈化室內(nèi)污染的作用。而在控制方面也有很多不同之處，因?yàn)楦鲉挝粚?duì)pcr實(shí)驗(yàn)的重視程度各有不同，所以在設(shè)計(jì)上也有不同，主要的控制設(shè)計(jì)有定送定排式壓力控制系統(tǒng)、變送定排式壓力控制系統(tǒng)變送變排式壓力控制系統(tǒng)。在控制設(shè)備方面也有很多區(qū)分如壓力無(wú)關(guān)型控制系統(tǒng)、壓力有關(guān)型控制系統(tǒng)。

根據(jù)業(yè)主要求，本pcr實(shí)驗(yàn)室為三區(qū)設(shè)計(jì)，各區(qū)可獨(dú)立使用，不設(shè)置高效過(guò)濾系統(tǒng)等相關(guān)要求，根據(jù)業(yè)主以上要求，我方給出的設(shè)計(jì)方案為壓力無(wú)關(guān)型變送變排壓力控制系統(tǒng)。本系統(tǒng)的特點(diǎn)是，設(shè)備啟動(dòng)后可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)使用節(jié)點(diǎn)調(diào)節(jié)送風(fēng)量及排風(fēng)量來(lái)控制各房間狀態(tài)，系統(tǒng)說(shuō)明見(jiàn)下圖

? 每個(gè)房間可分別控制，使用時(shí)通過(guò)房間開(kāi)關(guān)輸出啟動(dòng)信號(hào)，當(dāng)設(shè)備接到啟動(dòng)信號(hào)時(shí)設(shè)備運(yùn)行，運(yùn)行中根據(jù)管道壓力反饋決定變頻器大小，房間內(nèi)送排風(fēng)量由壓力無(wú)關(guān)型風(fēng)量調(diào)節(jié)閥控制。? 當(dāng)有多個(gè)房間開(kāi)啟或關(guān)閉時(shí)，設(shè)備更加管道壓力反饋，調(diào)節(jié)設(shè)備變頻器增加或減少送排風(fēng)量來(lái)穩(wěn)定管道壓力。各房間內(nèi)壓力又房間內(nèi)的壓力無(wú)關(guān)型定風(fēng)量閥進(jìn)行控制。

? 當(dāng)bsc（生物安全柜，b2全排）開(kāi)啟時(shí)bsc專用供風(fēng)機(jī)組運(yùn)行，bsc-供風(fēng)機(jī)-排風(fēng)機(jī)連鎖運(yùn)轉(zhuǎn)。

? 當(dāng)bsc做變風(fēng)量調(diào)節(jié)時(shí)，根據(jù)房間內(nèi)壓力變化，bsc專用供風(fēng)機(jī)組前安裝的壓力無(wú)關(guān)型變風(fēng)量調(diào)節(jié)閥根據(jù)壓力變化增減送風(fēng)量，確保房間壓力執(zhí)行在可控范圍內(nèi)。

? 當(dāng)房間不適用時(shí)，房間與緩沖間均關(guān)閉電動(dòng)密閉閥，確保房間處在密閉狀態(tài)避免布朗運(yùn)動(dòng)造成的可能污染風(fēng)險(xiǎn)。

? 房間換氣次數(shù)均按照一定凈化標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)，當(dāng)室內(nèi)污染發(fā)生時(shí)，通過(guò)一定時(shí)間的換氣處理后，污染問(wèn)題可以基本解決。? 本系統(tǒng)如果業(yè)主需要，可在室內(nèi)送風(fēng)口末端加裝高效過(guò)濾設(shè)備，房間可升級(jí)為凈化型實(shí)驗(yàn)室。

? 壓力無(wú)關(guān)型風(fēng)閥簡(jiǎn)介：壓力無(wú)關(guān)型風(fēng)閥的特點(diǎn)是不會(huì)根據(jù)管道壓力的變化而影響風(fēng)閥內(nèi)部的送風(fēng)量，在一定管道壓力區(qū)間內(nèi)能夠自行調(diào)節(jié)閥體阻力，來(lái)穩(wěn)定送風(fēng)量，是高端實(shí)驗(yàn)室必備的關(guān)鍵部件，目前此類閥體技術(shù)均有國(guó)外生產(chǎn)廠家控制，目前國(guó)內(nèi)主用使用的產(chǎn)品有妥思、文丘里、西門子等品牌。

pcr實(shí)驗(yàn)室工作制度及流程篇五

pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)

pcr實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域，進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開(kāi)各工作區(qū)域時(shí)，不得將工作服帶出，四區(qū)域分別為： 1.試劑配制區(qū)n 2.樣品處理區(qū)n 3.核酸擴(kuò)增區(qū)n 4.產(chǎn)物分析區(qū)n 如使用全自動(dòng)分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并,三四區(qū)可合并為擴(kuò)增產(chǎn)物分析。

各區(qū)的功能是： 1.1.1 試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。1.1.2 樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。1.1.3 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告。1.2 擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開(kāi)，須使用不同的房間，兩區(qū)之間最好有一定的間隔。1.3 使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。1.4 在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)： 1.4.1 在生物安全柜內(nèi)操作。1.4.2 每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材。1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。1.4.4 用有效的方法對(duì)操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。設(shè)計(jì)要求：

pcr實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式，也可以是組合形式,現(xiàn)要主要是以組合形式為主流。完成一組pcr實(shí)驗(yàn)，通常應(yīng)經(jīng)過(guò)試劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程，若實(shí)驗(yàn)工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉碎過(guò)程。

一、分散形式pcr實(shí)驗(yàn)室 所謂分散形式pcr實(shí)驗(yàn)室，是指完成上述實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn)，呈分散布置形式。對(duì)于這種布置形式的pcr實(shí)驗(yàn)室，由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾，因此無(wú)需特殊條件要求。

二、組合形式pcr實(shí)驗(yàn)室 所謂組合形式pcr實(shí)驗(yàn)室, 是指完成pcr四個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置，組成獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對(duì)于組合形式pcr實(shí)驗(yàn)室，由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對(duì)總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換。

試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染,可以通過(guò)控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。

核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品，可以通過(guò)控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。

在理想情況下，pcr實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。

pcr實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制，要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到指定定點(diǎn)，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

如果使用熒光pcr儀，擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。

若房間進(jìn)深允許，可設(shè)pcr內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過(guò)渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。

如果使用熒光pcr儀，擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。

若房間進(jìn)深允許，可設(shè)pcr內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障，避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。實(shí)驗(yàn)室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過(guò)渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無(wú)縫隙、無(wú)滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。主要設(shè)備試劑準(zhǔn)備區(qū) 儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺(tái)、加樣器、混勻器、天平和離心機(jī)等，加樣器、天平除了要專用外，還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。試劑分裝應(yīng)在超凈臺(tái)中進(jìn)行 擴(kuò)增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生物學(xué)級(jí)的，試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測(cè)試劑的擴(kuò)增效果。標(biāo)本制備區(qū) 儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機(jī)、溫育儀、混勻器等

擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增區(qū)的主要儀器是核酸擴(kuò)增儀、超凈臺(tái)、微量加樣器、離心機(jī)、可移動(dòng)紫外燈。擴(kuò)增儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。并配備ups電源，以防止由于電壓的波動(dòng)，停電對(duì)擴(kuò)增效果的影響。分析區(qū) 本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等

潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部分面積不能超過(guò)主實(shí)驗(yàn)室的八分之一,這是有規(guī)定的.1、主體結(jié)構(gòu)： 主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽(yáng)角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問(wèn)題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡(jiǎn)明，美觀大方，密封性好。

2、標(biāo)準(zhǔn)的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)： 將pcr過(guò)程分成試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本制備和pcr擴(kuò)增，產(chǎn)物分析四個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。整個(gè)區(qū)域有一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過(guò)氣壓調(diào)節(jié)，使整個(gè)pcr實(shí)驗(yàn)過(guò)程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染?？纱蜷_(kāi)緩沖區(qū)ⅰ，緩沖區(qū)ⅱ和 pcr 擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過(guò)回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。

3、消毒： 在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū) 還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒。

4、不銹鋼傳遞窗： 試劑和標(biāo)本通過(guò)機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標(biāo)本在傳遞過(guò)程中不受污染（人物分流）。

5、地面 地面建議使用pvc卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。

6、照明 燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。在建設(shè)的過(guò)程中應(yīng)注意： ●規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。●嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程?！癜惭b前需要確定以下安裝條件，如：電源電壓，電源進(jìn)線位置，電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置，進(jìn)水水壓，最小安裝空間，地面平整度，通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空間尺寸 樣本處理區(qū)

三、工作區(qū)域及設(shè)備要求

（一）試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū) 1、2-8c和-15c冰箱

2、混勻器

3、微量加樣器（覆蓋1-1000ul）

4、移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）

5、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾心）

6、專用工作服和工作鞋

7、專用辦公用品

（二）標(biāo)本制備區(qū) 1、2-8c冰箱、-20c或-80c冰箱

2、高速臺(tái)式冷凍離心機(jī)

3、混允器

4、水浴箱或加熱模塊

5、微量加樣器（覆蓋1-1000ul）

6、可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）

7、生物安全柜

8、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾心）

9、專用工作服和工作鞋

10、專用辦公用品 如需處理大分子dna，應(yīng)具有超聲波水浴儀。

（三）擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)

1、核酸擴(kuò)增儀

2、微量加樣器（覆蓋1-1000ul）

3、可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）

4、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、耐高壓處理的離心管和加樣器吸頭（帶濾心）

5、專用工作服和工作鞋

6、專用辦公用品(四)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 視檢驗(yàn)方法不同而定。基本儀器設(shè)備如下：

1、微量加樣器（覆蓋1-1000ul）

2、可移動(dòng)紫外燈（近工作臺(tái)面）

3、消耗品：一次性手套、一次性吸水紙、加樣器吸頭（帶濾心）

4、專用工作服和工作鞋

5、專用辦公用品 5.人員和樣品的安全是由生物安全柜和定向氣流共同來(lái)保證。pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)程中規(guī)定人員和樣品必須單向流動(dòng)。即從 “試劑準(zhǔn)備區(qū)到樣品制備區(qū)，再?gòu)臉悠分苽渥呦驍U(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)”，絕對(duì)不能反向流動(dòng)，以辟免交叉污染。氣流方向只規(guī)定試劑準(zhǔn)備區(qū)為微正壓或常壓，樣品制備區(qū)為常壓或負(fù)壓，擴(kuò)增區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū)為負(fù)壓，壓力梯度是從試劑準(zhǔn)備到產(chǎn)物分析區(qū)，是高到低的。規(guī)程并沒(méi)有規(guī)定要做成全新風(fēng)系統(tǒng)，但是為降低交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)，建議做成全新風(fēng)系統(tǒng)。概述 臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)又稱pcr實(shí)驗(yàn)，是專門用來(lái)檢驗(yàn)艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一種檢測(cè)手段。它可以通過(guò)將病毒體內(nèi)所含的基因進(jìn)行擴(kuò)增的方法，測(cè)出一些病毒含量不高的感染者體內(nèi)是否含有特定的病毒。由于該檢測(cè)方法可以測(cè)出普通檢驗(yàn)難以檢測(cè)出的病毒并具有靈敏度高、特異性高、快捷、對(duì)樣品要求低等優(yōu)點(diǎn)，因此被臨床醫(yī)生廣為認(rèn)可，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)院的臨床診斷和各防疫檢測(cè)部門的禽疫病診斷。但是，這種實(shí)驗(yàn)需要有能保證絕對(duì)安全、配置合理的實(shí)驗(yàn)室和非常規(guī)范的操作為前提。近年來(lái)對(duì)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)越來(lái)越得到重視，因?yàn)樗鼘?duì)檢測(cè)結(jié)果的可靠性、準(zhǔn)確性和安全性起到至關(guān)重要的作用。本文主要從臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的平面布局，空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制和污染的防制幾個(gè)方面對(duì) 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)中的主要特點(diǎn)進(jìn)行了闡述。臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題是如何避免污染。因此，實(shí)驗(yàn)室的平面布局、空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)、氣流控制等都是圍繞這個(gè)核心問(wèn)題進(jìn)行的。下面就對(duì)這幾個(gè)方面分別進(jìn)說(shuō)明。2 pcr實(shí)驗(yàn)室平面布局 臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域：試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。為避免交叉污染，進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行，即只能從試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過(guò)傳遞窗進(jìn)行。pcr實(shí)驗(yàn)室平面布置示意圖如圖1所示。圖1 pcr實(shí)驗(yàn)室平面布置示意圖 3 實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制 pcr實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。3.1 試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū) 該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對(duì)與氣流壓力的控制，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求。3.2 標(biāo)本制備區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(rna、dna)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定rna時(shí)cdna的合成。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。3.3 擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為dna或cdna擴(kuò)增。此外，已制備的dna模板和合成的cdna(來(lái)自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。在巢式pcr測(cè)定中，通常在第一輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管，因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性，第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。3.4 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè)，此區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，因此對(duì)本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。4 污染的預(yù)防與控制 pcr實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問(wèn)題是如何避免污染。在實(shí)際工作中，常見(jiàn)的有以下幾種污染類型：擴(kuò)增產(chǎn)物的污染；天然基因組dna的污染；試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。由于一旦發(fā)生污染，實(shí)驗(yàn)就必須停止，直到找到污染源為止，而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢，需重新進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。所以發(fā)生污染后再圍繞實(shí)驗(yàn)室來(lái)尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣，浪費(fèi)人力物力。因此要避免污染，首先應(yīng)是預(yù)防，而不是排除。4.1 工作區(qū)域的嚴(yán)格劃分（1）各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域設(shè)置合理；（2）各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域要有明顯的標(biāo)記（如醒目的門牌或不同的地面顏色等），以避免各個(gè)不同實(shí)驗(yàn)區(qū)域設(shè)備物品、試劑等發(fā)生混淆。4.2 合理的系統(tǒng)設(shè)置（1）合理的空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)置，盡量采用全送全排的空調(diào)系統(tǒng)；（2）嚴(yán)格的氣流壓力控制，保證不同的實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不同的壓力要求。4.3 規(guī)范的操作（1）臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員必須進(jìn)行上崗培訓(xùn)，經(jīng)培訓(xùn)合格后才能從事臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)的工作；（2）在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，操作者必須戴手套，并經(jīng)常更換。此外，操作中使用一次性帽子也是一個(gè)有效地防止污染的措施；（3）清潔工作及時(shí)、正確。實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束后，必須立即對(duì)本區(qū)進(jìn)行清潔。除常規(guī)的消毒液體對(duì)表面進(jìn)行擦拭消毒或紫外線燈的照射消毒外，對(duì)一些實(shí)驗(yàn)設(shè)備還應(yīng)進(jìn)行高壓消毒處理。4.4 嚴(yán)格的管理（1）嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員。與實(shí)驗(yàn)無(wú)關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室，有條件的情況下要設(shè)置獨(dú)立的通道和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門；（2）在各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域使用帶有明顯區(qū)別標(biāo)志的工作服（如不同顏色），當(dāng)工作人員離開(kāi)時(shí)不得將本區(qū)的工作服帶至其它區(qū)域；（3）盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性。（4）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，廢液不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒，必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉，用過(guò)的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡消毒后統(tǒng)一處理，如焚燒等；（5）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員的安全防護(hù)。4.5 完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施 完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器，如超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、加樣器等。

pcr實(shí)驗(yàn)室并沒(méi)有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力要求。3.1 試劑貯存和準(zhǔn)備區(qū) 該實(shí)驗(yàn)區(qū)主要進(jìn)行的操作為貯存試劑的制備、試劑的分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑和用于標(biāo)本制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)，不得經(jīng)過(guò)其他區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的貯存試劑。對(duì)與氣流壓力的控制，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求。3.2 標(biāo)本制備區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為臨床標(biāo)本的保存、核酸(rna、dna)提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定rna時(shí)cdna的合成。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染。另外，由于在加樣操作中可能會(huì)發(fā)生氣溶膠所致的污染，所以應(yīng)避免在本區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)。3.3 擴(kuò)增反應(yīng)混合物配制和擴(kuò)增區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為dna或cdna擴(kuò)增。此外，已制備的dna模板和合成的cdna(來(lái)自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。在巢式pcr測(cè)定中，通常在第一輪擴(kuò)增后必須打開(kāi)反應(yīng)管，因此巢式擴(kuò)增有較高的污染危險(xiǎn)性，第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)的壓力梯度要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動(dòng)。個(gè)別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺(tái)內(nèi)進(jìn)行。3.4 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū) 該區(qū)域主要進(jìn)行的操作為擴(kuò)增片段的測(cè)定。如使用全自動(dòng)封閉分析儀器檢測(cè)，此區(qū)域可不設(shè)。本區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來(lái)源，因此對(duì)本區(qū)的壓力梯度的要求為：相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。4.0傳遞窗口的尺寸：

普通傳遞窗規(guī)格: sat500 500x500x500（工作尺寸）sat600 600x600x600（工作尺寸）潔凈傳遞窗規(guī)格: sat600 600x600x600（工作尺寸）sat1000 600x1000x600（工作尺寸）