描寫(xiě)生物實(shí)驗(yàn)室觀(guān)察心得體會(huì)總結(jié)(5篇)

我們?cè)谝恍┦虑樯鲜艿絾l(fā)后，可以通過(guò)寫(xiě)心得體會(huì)的方式將其記錄下來(lái)，它可以幫助我們了解自己的這段時(shí)間的學(xué)習(xí)、工作生活狀態(tài)。好的心得體會(huì)對(duì)于我們的幫助很大，所以我們要好好寫(xiě)一篇心得體會(huì)下面我給大家整理了一些心得體會(huì)范文，希望能夠幫助到大家。

描寫(xiě)生物實(shí)驗(yàn)室觀(guān)察心得體會(huì)總結(jié)一

1、 對(duì)各實(shí)驗(yàn)室、標(biāo)本室、儀器室、研究室規(guī)章制度進(jìn)行修改與增補(bǔ)，做到制度切實(shí)可行，有章可循，按照制度辦事。

2、按實(shí)驗(yàn)室對(duì)儀器設(shè)備作進(jìn)一步的清點(diǎn)、維護(hù)，對(duì)損壞儀器進(jìn)行及時(shí)維修。進(jìn)一步按實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目對(duì)現(xiàn)有的設(shè)備進(jìn)行調(diào)整，以提高儀器設(shè)備的利用率，保證教學(xué)與科研的正常進(jìn)行。進(jìn)一步做好大型、精密儀器的管理工作。

3、做好實(shí)驗(yàn)室的搬遷工作，搬遷前認(rèn)真做好準(zhǔn)備，把一切可能遇到的困難都考慮在前頭，保證一件不少，一件不壞的把現(xiàn)有儀器搬遷到位。

4、做好迎評(píng)材料的準(zhǔn)備工作，增補(bǔ)完善迎評(píng)材料。進(jìn)一步對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行規(guī)范化管理，實(shí)驗(yàn)室按評(píng)估指標(biāo)要求進(jìn)行建設(shè)。

5、對(duì)新實(shí)驗(yàn)室的功能、布局、內(nèi)部設(shè)施進(jìn)行規(guī)劃。

6、認(rèn)真閱讀實(shí)驗(yàn)雜志，例如 ：實(shí)驗(yàn)教學(xué)與儀器雜志出版社出版的《實(shí)驗(yàn)教學(xué)與儀器》，以及其他有關(guān)的生物方面的讀物，取人之長(zhǎng)，以補(bǔ)己之短。借鑒別人的經(jīng)驗(yàn)、已經(jīng)比較成形的模型，結(jié)合自己的實(shí)際情況設(shè)計(jì)一些簡(jiǎn)單明了的實(shí)驗(yàn)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)。增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)生物的興趣，尤其注重學(xué)生的動(dòng)手動(dòng)腦的能力，發(fā)展學(xué)生的智力。

7、做好新儀器的訂購(gòu)工作，并對(duì)新到的儀器及時(shí)編號(hào)、登帳。對(duì)新儀器的說(shuō)明書(shū)保管好，并做好保養(yǎng)工作，自己先弄懂儀器的使用方法并調(diào)試好，及時(shí)向教師推薦，做到物盡其用，發(fā)揮其最大的效率。

8、按照上級(jí)規(guī)定，加強(qiáng)儀器管理力度，有毒藥品、危險(xiǎn)品分類(lèi)存放，并安裝紅外線(xiàn)自控報(bào)警器，全天對(duì)藥品、器材進(jìn)行監(jiān)控，以保證安全。

9、認(rèn)真鉆研教材、大綱，開(kāi)齊教材所規(guī)定的所有學(xué)生實(shí)驗(yàn)和演示實(shí)驗(yàn)。并針對(duì)實(shí)際不斷變化的教學(xué)內(nèi)容對(duì)現(xiàn)有的演示實(shí)驗(yàn)作一些改進(jìn)和增設(shè)一定的實(shí)驗(yàn)，以便在教學(xué)上有利于突破重點(diǎn)難點(diǎn)。

10、 協(xié)助好教師做好演示實(shí)驗(yàn)，保證每個(gè)演示實(shí)驗(yàn)?zāi)?00%成功。在進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)時(shí)，指導(dǎo)學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，及時(shí)處理實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的突發(fā)事件。

11、做好學(xué)生實(shí)驗(yàn)的輔導(dǎo)工作，在輔導(dǎo)過(guò)程中要充分體現(xiàn)仁愛(ài)思想，把先學(xué)后導(dǎo)，有效檢測(cè)的教學(xué)理念貫穿進(jìn)教學(xué)過(guò)程之中，還要做好實(shí)驗(yàn)的課外輔導(dǎo)工作，總有一些學(xué)生因?yàn)樯』蚱渌驔](méi)來(lái)上課，這一部分學(xué)生就利用中午的時(shí)間安排來(lái)補(bǔ)做實(shí)驗(yàn)。另外對(duì)一部分實(shí)驗(yàn)較差的學(xué)生進(jìn)行輔導(dǎo)，使其能很快掌握實(shí)驗(yàn)步驟以及正確的操作方法。

12、要認(rèn)真做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作，及時(shí)做好儀器的清理歸類(lèi)工作，對(duì)儀器上的灰塵也要一星期擦一次。

本學(xué)期我們實(shí)驗(yàn)室工作人員不光要做好本職工作，還要大力協(xié)助任課教師搞好實(shí)驗(yàn)教學(xué)，使實(shí)驗(yàn)室管理再上一個(gè)新的臺(tái)階。

描寫(xiě)生物實(shí)驗(yàn)室觀(guān)察心得體會(huì)總結(jié)二

以培養(yǎng)小學(xué)生科學(xué)素養(yǎng)為宗旨，積極倡導(dǎo)讓學(xué)生親身經(jīng)歷以探究為主的學(xué)習(xí)活動(dòng)，培養(yǎng)他們的好奇心和探究欲，發(fā)展他們對(duì)科學(xué)本質(zhì)的理解，使他們學(xué)會(huì)探究解決問(wèn)題的策略，為他們終身的學(xué)習(xí)和生活打好基礎(chǔ)。

1、學(xué)生整體學(xué)習(xí)興趣高，比較認(rèn)真，但缺乏靈活性、學(xué)習(xí)習(xí)慣較差。不善于設(shè)法自主去獲取知識(shí)并在生活中靈活運(yùn)用知識(shí)。因而學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的掌握往往只停留在了解上，理解不甚深刻，運(yùn)用能力差。

2、已有知識(shí)、經(jīng)驗(yàn)：學(xué)生由于各種條件的限制，科學(xué)常識(shí)比較缺乏，科學(xué)探究能力和意識(shí)不強(qiáng)。家長(zhǎng)們偏重于語(yǔ)、數(shù)、英教學(xué)，使學(xué)生沒(méi)有多少時(shí)間和機(jī)會(huì)接觸大自然，更沒(méi)有得到大人和老師及時(shí)、周到的指導(dǎo)，使學(xué)生沒(méi)能很好地在觀(guān)察、實(shí)驗(yàn)、調(diào)查等實(shí)踐活動(dòng)中獲取知識(shí)、發(fā)展能力、培養(yǎng)思想情感。

3、 兒童心理分析：在小學(xué)階段，兒童對(duì)周?chē)澜缬兄鴱?qiáng)烈的好奇心和探究欲望，他們樂(lè)于動(dòng)手操作具體形象的物體，而我們的科學(xué)課程內(nèi)容貼近小學(xué)生的的生活，強(qiáng)調(diào)用符合小學(xué)生年齡特點(diǎn)的方式學(xué)習(xí)科學(xué)，學(xué)生必將對(duì)科學(xué)學(xué)科表現(xiàn)出濃厚的興趣。

本冊(cè)教材著重培養(yǎng)和訓(xùn)練學(xué)生整理信息的能力。圍繞“生命世界”、“物質(zhì)世界”開(kāi)展探究活動(dòng)。安排了“植物的一生”、“翩翩雌與雄”、“位置與運(yùn)動(dòng)”、“力與運(yùn)動(dòng)”、“物質(zhì)的變化”、“整理信息，讓我們發(fā)現(xiàn)更多”六個(gè)主題單元，共設(shè)計(jì)了44個(gè)活動(dòng)。

“植物的一生”：根據(jù)植物一生所經(jīng)歷的過(guò)程安排教學(xué)內(nèi)容，通過(guò)種植、觀(guān)察、記錄、整理信息等活動(dòng)，使學(xué)生了解植物一生所經(jīng)歷的過(guò)程，發(fā)現(xiàn)植物生長(zhǎng)變化規(guī)律。

“翩翩雌與雄”：教材以植物的繁殖與動(dòng)物的繁殖、有性繁殖與無(wú)性繁殖兩條主線(xiàn)安排教學(xué)內(nèi)容。引領(lǐng)學(xué)生通過(guò)觀(guān)察、實(shí)驗(yàn)、閱讀活動(dòng)了解生物繁殖的方式。對(duì)于本單元教學(xué)內(nèi)容的探究方式以接受式探究為主。

“位置與運(yùn)動(dòng)”：通過(guò)觀(guān)察、描述、游戲、實(shí)驗(yàn)、測(cè)量、統(tǒng)計(jì)分析等活動(dòng)，引領(lǐng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)：描述物體位置時(shí)需要用到參照物、方位和距離3個(gè)因素；描述物體的運(yùn)動(dòng)需要用到參照物、位置、方向和快慢（速度）

“力與運(yùn)動(dòng)”：首先通過(guò)游戲、體驗(yàn)等活動(dòng)使學(xué)生感受到在生活中力無(wú)處不在；然后通過(guò)試驗(yàn)、游戲、測(cè)量、統(tǒng)計(jì)等活動(dòng)指導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識(shí)彈力、重力、摩檫力。

“物質(zhì)的變化”：首先在幫助學(xué)生建立物質(zhì)的變化分為可逆的變化與不可逆的變化的概念；然后指導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識(shí)有些變化產(chǎn)生了新物質(zhì)，滲透化學(xué)變化的概念；最后，綜合前面所學(xué)進(jìn)行應(yīng)用，同時(shí)滲透物質(zhì)守恒的原理。

“整理信息，讓我們發(fā)現(xiàn)更多”：回顧本學(xué)期整理資料的活動(dòng)，歸納總結(jié)整理資料的方法。激勵(lì)學(xué)生在后繼的探究活動(dòng)中繼續(xù)應(yīng)用這些方法整理信息。

1、培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)的思維方法，努力發(fā)展學(xué)生解決問(wèn)題的能力，使得學(xué)生們?cè)谌粘Ｉ钪杏H近科學(xué)、運(yùn)用科學(xué)，把科學(xué)轉(zhuǎn)化為對(duì)自己日常生活的指導(dǎo)，逐漸養(yǎng)成科學(xué)的行為習(xí)慣和生活習(xí)慣；

2、了解科學(xué)探究的過(guò)程和方法，讓學(xué)生親身經(jīng)歷科學(xué)探究的全過(guò)程，從中獲得科學(xué)知識(shí)，增長(zhǎng)才干，體會(huì)科學(xué)探究的樂(lè)趣，理解科學(xué)的真諦，逐步學(xué)會(huì)科學(xué)地看問(wèn)題、想問(wèn)題；

3、繼續(xù)指導(dǎo)、引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)運(yùn)用假設(shè)，分析事物之間的因果關(guān)系，注重觀(guān)察實(shí)驗(yàn)中的測(cè)量，特別是控制變量、采集數(shù)據(jù)，并對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果作出自己的解釋?zhuān)瑢W(xué)習(xí)建立解釋模型，以驗(yàn)證自己的假設(shè)。

4、保持和發(fā)展對(duì)周?chē)澜绲暮闷嫘呐c取知欲，形成大膽細(xì)心、注重證據(jù)、敢于質(zhì)疑的科學(xué)態(tài)度和愛(ài)科學(xué)、愛(ài)家鄉(xiāng)、愛(ài)祖國(guó)的情感；

1、把科學(xué)課程的總目標(biāo)落實(shí)到每一節(jié)課；

2、把握小學(xué)生科學(xué)學(xué)習(xí)特點(diǎn)，因勢(shì)利導(dǎo)；

3、用豐富多彩的親歷活動(dòng)充實(shí)教學(xué)過(guò)程；

4、讓探究成為科學(xué)學(xué)習(xí)的主要方式；

5、樹(shù)立開(kāi)放的教學(xué)觀(guān)念；

6、悉心地引導(dǎo)學(xué)生的科學(xué)學(xué)習(xí)活動(dòng)；

7、各班建立科學(xué)學(xué)習(xí)合作小組，讓學(xué)生在相互交流、合作、幫助、研討中學(xué)習(xí)。

周 次 教 材 內(nèi) 容第一周播撒希望的種子第二周小苗快快長(zhǎng) 第三周開(kāi)花結(jié)果

第四周花開(kāi)花落為哪般

第五周

第六周

第七周

第八周

第九周

第十周

第十一周

第十二周

第十三周

第十四周

第十五周

第十六周

第十七周

第十八周

第十九周

第二十周

描寫(xiě)生物實(shí)驗(yàn)室觀(guān)察心得體會(huì)總結(jié)三

質(zhì)粒dna的提取、純化及檢測(cè)

姓名：xxx學(xué)號(hào)：2011001400xx年級(jí)：20xx級(jí)生物基地班 實(shí)驗(yàn)日期：20xx年9月16日—30日組別：6組 同組者：xx

1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒dna的原理和方法。

2、學(xué)習(xí)并掌握凝膠電泳進(jìn)行dna的分離純化的實(shí)驗(yàn)原理。

3、學(xué)習(xí)并掌握凝膠的制備及電泳方法。

4、學(xué)習(xí)并掌握凝膠中dna的分離純化方法。

1、質(zhì)粒dna的制備方法

質(zhì)粒（plasmid）是獨(dú)立存在于染色體外、能自主復(fù)制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈dna分子，分布于細(xì)菌、放線(xiàn)菌、真菌以及一些動(dòng)植物細(xì)胞中，但在細(xì)菌細(xì)胞中含量最多。細(xì)菌質(zhì)粒大小介于1～200kb之間，是應(yīng)用最多的質(zhì)粒類(lèi)群，在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)它們利用宿主細(xì)胞的復(fù)制機(jī)構(gòu)合成質(zhì)粒自身的dna。

質(zhì)粒dna的制備包括3個(gè)步驟：①培養(yǎng)細(xì)菌，使質(zhì)粒dna大量擴(kuò)增；②收集和裂解細(xì)菌；③分離和純化質(zhì)粒dna。主要方法包括：堿裂解法：0。2molnaoh+1%sds；煮沸裂解法：沸水煮沸40秒；sds裂解法：10%sds，一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據(jù)宿主菌株類(lèi)型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)以及質(zhì)粒dna的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗(yàn)選擇堿裂解法提取質(zhì)粒dna。

2、質(zhì)粒dna的提取——堿變性提取法

在細(xì)菌細(xì)胞中，染色體dna和質(zhì)粒dna均被釋放出來(lái)，但是兩者變性與復(fù)性所依賴(lài)的溶ph值不同。在ph值高達(dá)12。0的堿性溶液中，染色體dna的氫鍵斷裂，雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性；共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒dna的大部分氫鍵斷裂，但兩條互補(bǔ)鏈不完全分離。因?yàn)樗鼈冊(cè)谕負(fù)鋵W(xué)上是相互纏繞的。當(dāng)用ph值4。6的kac（naac）高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時(shí)，變性的質(zhì)粒dna可恢復(fù)原來(lái)的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中；但染色體dna不能復(fù)性，而是與不穩(wěn)定的大分子rna、蛋白質(zhì)—sds復(fù)合物等一起形成纏連的、可見(jiàn)的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過(guò)離心，與復(fù)性的溶于溶液的質(zhì)粒dna分離。溶于上清液的質(zhì)粒dna，可用無(wú)水乙醇和鹽溶液，使之凝聚而形成沉淀。由于dna和rna性質(zhì)類(lèi)似，乙醇沉淀

dna的同時(shí)，也伴隨著rna沉淀，可利用rnasea將rna降解。質(zhì)粒dna溶液中的rnasea以及一些可溶性蛋白，可通過(guò)酚/氯仿抽提除去，最后獲得純度較高的質(zhì)粒dna。

3、凝膠電泳進(jìn)行dna分離純化

電泳（electrophoresis）是帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中向著與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定ph條件下，可以解離成帶電荷的離子，在電場(chǎng)中會(huì)向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì)，它具有分子篩效應(yīng)。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中，其中的電離子會(huì)發(fā)生移動(dòng)，移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異，就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而，凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化dna的片段，是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。

凝膠電泳技術(shù)操作簡(jiǎn)單而迅速，分辨率高，分辨范圍廣。此外，凝膠中dna的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠（ethidium bromide，eb）或sybr gold染色直接觀(guān)察到，甚至含量少至20pg的雙鏈dna在紫外激發(fā)下也能直接檢測(cè)到。需要的話(huà)，這些分離的dna條帶可以從凝膠中回收，用于各種各樣目的的實(shí)驗(yàn)。

分子生物學(xué)中，常用的兩種凝膠為瓊脂糖（agarose）和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑，也能以許多不同的構(gòu)型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高，使用于較小分子核酸（5—500bp）的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高，長(zhǎng)度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的dna都可以彼此分離，這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行dna序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進(jìn)行電泳，并能容納較大的dna上樣量，但是與瓊脂糖凝膠相比，在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長(zhǎng)鏈狀多聚物，由β—d—吡喃半乳糖與3，6—脫水—l—吡喃半乳糖組成，相對(duì)分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右，即可溶化形成清亮、透明的液體，澆在模版上冷卻后形成凝膠，其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低，但它的分離范圍更大（50至百萬(wàn)bp），小片段dna（50—20000bp）最適合在恒定輕度和方向的電場(chǎng)中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作，適用于核酸電泳，測(cè)定dna的相對(duì)分子質(zhì)量，分離經(jīng)限制酶水解的dna的片段，進(jìn)一步純化dna等。

瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中，由于核酸有磷酸基而帶有負(fù)電荷，在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。dna在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素：樣品dna分子的大小、dna分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場(chǎng)、緩沖液和溫度。

1、實(shí)驗(yàn)儀器

培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管（eppendorf管）、高速離心機(jī)、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號(hào)槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號(hào)筆、手套等。

2、實(shí)驗(yàn)試劑

lb培養(yǎng)基，抗生素ap（氨芐青霉素），溶液ⅰ，溶液ⅱ，溶液ⅲ，rnasea母液，te緩沖液，飽和酚，氯仿/異戊醇混合液，酚/氯仿/異戊醇（pci）混合液，預(yù)冷無(wú)水乙醇，tae電泳緩沖液（10×），上樣緩沖液（6×），瓊脂糖，溴化乙錠（eb），dna相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物dna marker λ/hind ⅲ，5mol/l ph 5。2的醋酸鈉。

1、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)

配制lb液體培養(yǎng)基，分裝到100ml的三角瓶中20ml，300ml的三角瓶中50ml，另配lb固體培養(yǎng)基；準(zhǔn)備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒，1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中，50ml離心管2個(gè) ，將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。

2、菌體培養(yǎng)

在含有ap的lb平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒puc19的e。coli dh5單菌落，接種于20mllb液體培養(yǎng)基中進(jìn)行37℃振蕩過(guò)夜培養(yǎng)，培養(yǎng)基中加ap100ul

（100ug/ml），質(zhì)粒puc19具有ap抗性基因，使得帶有puc19的質(zhì)粒得以生長(zhǎng)。 過(guò)夜培養(yǎng)后菌體量大，雜質(zhì)較多，然后用移液槍吸取過(guò)夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mllb液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中加入ap250ul，37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期，生長(zhǎng)速率快，代謝旺盛，酶系活躍，雜質(zhì)少，適合提取質(zhì)粒。

3、質(zhì)粒提取

（1）稱(chēng)量空的50ml離心管的重量為14。331g，然后將三角瓶中的菌液倒至管中，不能倒?jié)M，液面距管口約1cm，7000rpm離心5分鐘后棄去上清液，收集菌體細(xì)胞。

（2）向離心管中懸滴加入5ml冰預(yù)冷的溶液ⅰ打散菌體洗滌，用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻，同步驟（1）離心，棄去上清，將離心管倒置于吸水紙上，使上清液全部流盡干燥，然后稱(chēng)重得14。437g，則菌體質(zhì)量為106mg。

（3）洗滌后每100mg菌體應(yīng)加入冰預(yù)冷的溶液ⅰ1ml，106mg菌體按100mg菌體處理，加入溶液ⅰ1ml，打散菌泥、吹吸混勻，冰浴5min。溶液ⅰ中的葡萄糖使

溶液密度增加，懸浮后的大腸桿菌不會(huì)快速沉積到管子的底部；維持滲透壓，防止細(xì)胞提前破裂，防止dna受機(jī)械剪切力作用而降解。edta是ca2+和mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑，可抑制dnase的活性，抑制微生物的生長(zhǎng)。tris—cl溶液提供適當(dāng)?shù)膒h。

（4） 按比例加入新配制的溶液ⅱ2ml（與溶液ⅰ對(duì)應(yīng)），輕加輕搖，冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液ⅱ中的naoh使細(xì)胞膜發(fā)生了從bilayer（雙層膜）結(jié)構(gòu)向micelle（微囊）結(jié)構(gòu)的相變化導(dǎo)致細(xì)胞溶解。同時(shí)，強(qiáng)堿性使染色體dna、質(zhì)粒dna和蛋白質(zhì)變性；sds為下一步沉淀做鋪墊。

（5）按比例加入冰預(yù)冷的溶液ⅲ1。5ml（與溶液ⅰ、ⅱ對(duì)應(yīng)），輕加輕搖，冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)sds復(fù)合物、細(xì)胞碎片和其他大分子成分。溶液ⅲ中的hac中和naoh，因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的堿性條件會(huì)打斷基因組dna，只要是50－100 kb大小的片斷，就不能再被pds共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒dna復(fù)性。反應(yīng)形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。

（6）12000rpm離心15min，白色沉淀聚集在離心管一側(cè)，用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3mnaac混勻，加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶，乙醇與核酸不會(huì)起任何化學(xué)反應(yīng)，對(duì)dna很安全，因此是理想的沉淀劑。 dna溶液是dna以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時(shí)，乙醇會(huì)奪去dna周?chē)乃肿樱筪na失水而易于聚合。在ph為8左右的溶液中，dna分子是帶負(fù)電荷的，加一定濃度的naac或nacl，易于互相聚合而形成dna鈉鹽沉淀。

（7） 以12000rpm離心15min，小心倒去上清液，得到dna沉淀。加入3ml70%冰乙醇，輕輕地覆蓋沉淀，不打散沉淀，洗滌一次。

（8）以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。去掉上清液，將離心管上沉淀部位做好標(biāo)記，將離心管倒置于吸水紙上，干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色，隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o(wú)色。所以為了完全溶解質(zhì)粒，要在離心管上標(biāo)記質(zhì)粒所在位置。

（9）將dna沉淀溶于1mlte緩沖液中，移液槍吹吸助溶，然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個(gè)eppendorf管中。te是ph緩沖液，為dna提供穩(wěn)定的生理狀態(tài)，呈弱堿性，有利于保護(hù)堿基對(duì)。同時(shí)含有edta是二價(jià)陽(yáng)離子的螯合劑，抑制dna酶作用。

4、質(zhì)粒純化

（1）eppendorf管中加入rnase a（純濃度＞50ug/ml），37℃保溫0。5—1h

（2）將上述的溶液平均分配到2個(gè)1。5ml的微量離心管中，每管0。5ml，分別加入與溶液等體積的（500ul）tris飽和苯酚溶液，振蕩混勻，7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的eppendorf管中。苯酚是經(jīng)tris飽和后的，顯黃色。苯

酚加入后，溶液分層，苯酚向下，下層呈淺黃色，上層溶液無(wú)色，在中間產(chǎn)生大量白色沉淀，此為變性后的蛋白質(zhì)。

（3）加入等體積的（500ul）苯酚/氯仿溶液（1：1），振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的eppendorf管中。苯酚是強(qiáng)的蛋白變性劑，但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì)影響dna的酶切，它本身易被氧化，會(huì)損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑，但是比酚弱，且能溶解質(zhì)粒中的脂類(lèi)，溶解苯酚，去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的泡沫，有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀，但仍有蛋白質(zhì)的存在。

（4）加入等體積的氯仿溶液，振蕩混勻， 7000rpm，離心5min，上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的eppendorf管中，得上清液400ul。

（5）向上清液中加入1/10體積的naac混勻，再加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇，混勻，—20℃下沉降30分鐘。

（6）以12000rpm，離心15min，棄去上清液，得到dna沉淀，為白色。

（7）向dna沉淀中加入70%冰乙醇200ul，不打散沉淀，洗滌。然后以12000rpm離心5min，離心管底部dna沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。

（8）去掉上清液，將離心管倒置于吸水紙上，室溫干燥。用50ulte溶解于1管中。

5、質(zhì)粒檢測(cè)

（1）稱(chēng)取0。4g的瓊脂糖，置于一錐形瓶中，在三角瓶上標(biāo)好液面位置，加入40ml的1×tae電泳緩沖液，再加入5—10ml重蒸水，以補(bǔ)充在溶膠過(guò)程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化，溶液透明。冷卻至50℃左右，倒入制板槽制板。

（2）待膠凝固后，小心拔起梳子，使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×tae 電泳緩沖液，至液面覆蓋過(guò)膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上，用移液槍混勻。

（3）電泳1h，觀(guān)察溴酚蘭的帶（藍(lán)色）的移動(dòng)。

（4） 把膠槽取出，小心滑出膠塊，放進(jìn)eb溶液中進(jìn)行染色，完全浸泡約5min。

（5）凝膠成像儀觀(guān)察。

（1）滴加溶液ii時(shí)，要逐滴加入，且要輕加輕搖溶液使之混勻，整體動(dòng)作要快，因?yàn)閺?qiáng)堿在溶液中停留時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)破壞質(zhì)粒dna。

（2）加入溶液iii后，生成了大量的絮狀沉淀，溶液iii中和強(qiáng)堿使質(zhì)粒復(fù)性，不可劇烈震蕩， 防止染色體dna斷裂，應(yīng)該上下顛倒離心管，使其混勻。

描寫(xiě)生物實(shí)驗(yàn)室觀(guān)察心得體會(huì)總結(jié)四

生物科學(xué)是一門(mén)實(shí)驗(yàn)科學(xué)，生物實(shí)驗(yàn)則是學(xué)生學(xué)習(xí)生物知識(shí)的必要途徑，實(shí)驗(yàn)教學(xué)是生物教學(xué)中的一個(gè)重要組成部分，中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室工作計(jì)劃。在這個(gè)學(xué)期中為了使崖子初中的生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)有一個(gè)好的效果，所以我制定了一份具體的工作計(jì)劃。

具體內(nèi)容如下：

1、認(rèn)真看書(shū)學(xué)習(xí)，多掌握一些生物實(shí)驗(yàn)方面的知識(shí)，取人之長(zhǎng)，以補(bǔ)己之短。借鑒別人的經(jīng)驗(yàn)、已經(jīng)比較成形的模型，結(jié)合自己的實(shí)際情況設(shè)計(jì)一些簡(jiǎn)單明了的實(shí)驗(yàn)改進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)。增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)生物的興趣，尤其注重學(xué)生的動(dòng)手動(dòng)腦的能力，發(fā)展學(xué)生的智力。

2、對(duì)所有的儀器及時(shí)編號(hào)、登帳。由于學(xué)校的搬遷，學(xué)?，F(xiàn)有的儀器由三部分組成——學(xué)校原有的、分校的、原二中的，這就需要對(duì)所有的儀器重新排序，重新編號(hào)，在學(xué)校統(tǒng)一的領(lǐng)導(dǎo)和規(guī)劃下，重新建賬，重新填寫(xiě)儀器柜號(hào)和有關(guān)的內(nèi)容，規(guī)范管理儀器，工作計(jì)劃《中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室工作計(jì)劃》。并按學(xué)校要求做好明細(xì)賬。在學(xué)校校產(chǎn)管理員的培同下，本學(xué)期清查一次儀器。

3、對(duì)分校各班學(xué)生按照實(shí)驗(yàn)室座位排座次，學(xué)生做實(shí)驗(yàn)時(shí)要有秩序

地進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，并對(duì)號(hào)入座，協(xié)助任課老師維持好實(shí)驗(yàn)室秩序。

4、認(rèn)真鉆研教材、大綱，開(kāi)齊教材所規(guī)定的所有學(xué)生實(shí)驗(yàn)和演示實(shí)驗(yàn)。并針對(duì)實(shí)際不斷變化的教學(xué)內(nèi)容對(duì)現(xiàn)有的演示實(shí)驗(yàn)作一些改進(jìn)和增設(shè)一定的實(shí)驗(yàn)，以便在教學(xué)上有利于突破重點(diǎn)難點(diǎn)。

5、協(xié)助好教師做好演示實(shí)驗(yàn)，保證每個(gè)演示實(shí)驗(yàn)?zāi)?00%成功。在進(jìn)行分組實(shí)驗(yàn)時(shí)，指導(dǎo)學(xué)生順利進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，并及時(shí)處理實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的突發(fā)事件。

6、備好各種材料，如：實(shí)驗(yàn)室計(jì)劃、總結(jié)，各級(jí)部分組實(shí)驗(yàn)和演示實(shí)驗(yàn)配檔。認(rèn)真填寫(xiě)各種表格，嚴(yán)格簽字手續(xù)，并督促別人填表和簽字。制度上墻，并按要求懸掛整齊、美觀(guān)。

7、搞好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作。保持地面、窗臺(tái)、實(shí)驗(yàn)桌面干凈，無(wú)塵土，空中無(wú)灰網(wǎng)。門(mén)窗玻璃整潔，窗簾潔凈，不打結(jié)；經(jīng)常開(kāi)窗通風(fēng)，保持室內(nèi)干燥，儀器柜內(nèi)無(wú)灰塵、無(wú)斑點(diǎn)。每做完一次實(shí)驗(yàn)要及時(shí)打掃衛(wèi)生，保證每月一次衛(wèi)生大清查，并及時(shí)做好儀器的清理歸類(lèi)工作。

8、做好各防護(hù)措施，做到“十防”。防潮、防火。防鼠，防銹（腐蝕、霉）、防塵、防光、防毒、防震等。

9、每月底將月工作總結(jié)及教師的實(shí)驗(yàn)情況統(tǒng)計(jì)表填好，送交教導(dǎo)處。

描寫(xiě)生物實(shí)驗(yàn)室觀(guān)察心得體會(huì)總結(jié)五

一、指導(dǎo)思想

通過(guò)實(shí)驗(yàn)教學(xué)培養(yǎng)學(xué)生觀(guān)察問(wèn)題、思考問(wèn)題和分析問(wèn)題的能力及小組的協(xié)作精神。讓學(xué)生通過(guò)現(xiàn)象觀(guān)察事物的本質(zhì)，從而認(rèn)識(shí)和揭示自然科學(xué)規(guī)律，培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度和追求真理的意識(shí)，切實(shí)讓素質(zhì)教育落實(shí)到實(shí)處。

二、教學(xué)要求

1.演示實(shí)驗(yàn)必須按課標(biāo)要求開(kāi)足，教師在課堂上用演示的方法面向全體學(xué)生進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。通過(guò)觀(guān)察實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象，使學(xué)生能夠獲得感性的認(rèn)識(shí)和驗(yàn)證，以加深對(duì)理論知識(shí)的理解。若有條件可改成分組實(shí)驗(yàn)，增強(qiáng)學(xué)生的切身體驗(yàn)。

2.學(xué)生分組實(shí)驗(yàn)，也要按課程標(biāo)準(zhǔn)的要求把學(xué)生實(shí)驗(yàn)全部開(kāi)齊。對(duì)于學(xué)生實(shí)驗(yàn)，若能當(dāng)堂看清實(shí)驗(yàn)結(jié)果的須在實(shí)驗(yàn)室里教師指導(dǎo)下進(jìn)行，教師監(jiān)督學(xué)生對(duì)每個(gè)實(shí)驗(yàn)達(dá)到操作規(guī)范、熟練的程度;培養(yǎng)他們濃厚的生物學(xué)興趣和語(yǔ)言表達(dá)能力。

三、實(shí)驗(yàn)課的教學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)課教學(xué)應(yīng)根據(jù)教學(xué)目的、教學(xué)內(nèi)容、學(xué)生實(shí)際和設(shè)備條件等因素，采取探究式教學(xué)方法。讓學(xué)生多動(dòng)腦、多思考，鍛煉自己能找到一些新方法、新步驟;在講授理論知識(shí)時(shí)，最好讓學(xué)生通過(guò)實(shí)驗(yàn)的方法去歸納出這些知識(shí)，這樣做重在培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)素質(zhì)，培養(yǎng)學(xué)生科學(xué)研究的思路與方法;加強(qiáng)能力的培養(yǎng)和知識(shí)的遷移，有利于充分發(fā)揮其科學(xué)思維和想象力。

四、實(shí)驗(yàn)教學(xué)的準(zhǔn)備工作

1.制定出本學(xué)期實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)度計(jì)劃，并寫(xiě)明實(shí)驗(yàn)?zāi)夸?，?xiě)明實(shí)驗(yàn)的日期、班級(jí)、節(jié)次、名稱(chēng)，教學(xué)中按計(jì)劃安排實(shí)驗(yàn)。

2.任課教師須將實(shí)驗(yàn)通知單提前送交實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)教師必須將每個(gè)實(shí)驗(yàn)用到的儀器、藥品以及其他有關(guān)事宜提前準(zhǔn)備好，做到有備無(wú)患。

五、將德育工作滲透于教學(xué)中

1、讓學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中明確相互協(xié)助的重要性，培養(yǎng)學(xué)生在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中團(tuán)結(jié)合作的精神。

2.要教育學(xué)生遵守實(shí)驗(yàn)規(guī)則，愛(ài)護(hù)財(cái)務(wù)，節(jié)約用水、電、藥品，從而養(yǎng)成勤儉節(jié)約的美德。

3.要求學(xué)生嚴(yán)格認(rèn)真的按照實(shí)驗(yàn)要求來(lái)操作，細(xì)心觀(guān)察、發(fā)現(xiàn)問(wèn)題、提出問(wèn)題、解決問(wèn)題，培養(yǎng)他們嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。

4.培養(yǎng)學(xué)生井然有序的工作習(xí)慣。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，把儀器放回原處，整理好實(shí)驗(yàn)臺(tái)，填寫(xiě)好實(shí)驗(yàn)記錄。

六、本學(xué)期實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)度表